Vibrio cholerae 분리를 위한 알칼리성 한천 배지. 배지 분류 알칼리성 영양 한천

정확히 처방 된 복용량의 비타민. 그들은 아미노산을 질소 공급원으로 사용합니다. 이 배지의 장점은 구성이 일정하고 특정 영양소에서 미생물의 요구 사항을 결정하는 데 사용할 수 있다는 것입니다.

고체 배양 배지는 실런트를 첨가하여 액체 배지에서 준비됩니다. Agar-agar는 일반적으로 실런트로 사용됩니다. Agar-agar - 해조류에서 얻은 제품으로 황색을 띠는 분말 또는 판으로 고분자 다당류를 함유하고 대부분의 미생물에 의해 분해되지 않으며 고압 멸균 중에 분해되지 않으며 배지의 영양가를 변경하지 않으며 억제하지 않습니다. 미생물의 성장. 면역학 및 세균학 분야의 경우 동결되고 정화 된 한천이 사용되며 물과 분말의 혼합물을 끓이거나 고압 멸균 할 때 85-100 ° C의 온도에서 녹고 45-48 ° C로 냉각되면 겔을 형성합니다.

고형 영양 배지의 제조를 위해 한천 한천을 1.5~3% 농도로 첨가합니다.

단순한 환경.

고기 펩톤 국물(BCH)모든 매체의 단백질 기초입니다.

BCH를 준비하는 방법에는 여러 가지가 있습니다.

a) 기성품 펩톤이 첨가 된 고기 물에 - 이것은 소위 고기 펩톤 국물입니다.

b) 효소(트립신 - Hottinger의 국물, 펩신 - Martin 국물)를 사용한 공급원료의 가수분해 생성물의 소화.

그들은 운송이 편리하고 장기간 보관할 수 있으며 실험실에서 미디어를 준비하는 엄청난 과정을 덜어주고 미디어 표준화 문제를 해결하는 데 더 가까이 다가갑니다. 의료 산업은 건조 Endo, Levin, Ploskirev 배지, bismuth sulfite agar, 영양 한천, BP 표시기가 있는 탄수화물 등을 생산합니다.

온도 조절기

미생물 배양을 위해 온도 조절 장치가 사용됩니다.

온도 조절기는 일정한 온도를 유지하는 장치입니다. 장치는 공기 또는 물이 순환하는 히터, 챔버, 이중 벽으로 구성됩니다. 온도는 온도 조절기에 의해 조절됩니다. 대부분의 미생물이 번식하기에 최적의 온도는 37 ° C입니다.

플레이트 한천의 제조 방법

MPA는 수조에서 녹인 다음 50-55 ° C로 냉각됩니다. 병의 목을 알코올 램프의 불꽃으로 태우고 페트리 접시를 열어 병의 목이 들어가도록 컵의 가장자리를 건드리지 않고 10-15 ml의 MPA를 부어 뚜껑을 닫고, 컵을 흔들어 매체가 고르게 분포되도록 하고 응고될 때까지 수평면에 둡니다. 건조 후, 한천 플레이트는 추운 곳에 보관됩니다.

루프 파종

멸균 냉각 루프로 한 방울의 재료를 취하고 왼손으로 컵의 한쪽 가장자리를 열고 루프를 안쪽으로 삽입하고 반대쪽 가장자리에서 여러 스트로크를 한 곳에서 루프 한 다음 루프를 찢고 재료는 컵의 한쪽 가장자리에서 다른 쪽 가장자리까지 5-6mm 간격으로 평행 스트로크로 접종됩니다. 접종 초기에 루프에 많은 미생물이 있으면 합류 성장을 하게 되지만 루프에 있는 미생물은 점점 더 적어지며 독방을 유지하고 고립된 콜로니를 제공합니다.

Drygalski 방법에 따른 파종

이 방법은 미생물(고름, 대변, 가래)이 풍부하게 파종된 재료를 파종할 때 사용됩니다. Drygalsky 방법에 따라 파종하려면 주걱과 여러 컵 (3-4)을 가져 가십시오. 퍼티 나이프- 금속선이나 유리막대로 만든 기구로서 삼각형이나 L자 형태로 구부러져 있다. 재료를 루프 또는 피펫으로 첫 번째 컵에 넣고 주걱으로 배지 표면에 고르게 펴고 같은 주걱으로 태우지 않고 재료를 두 번째 컵의 영양 배지에 문지른 다음 세 번째. 이 접종으로 첫 번째 접시에서 합류 성장이 일어나고 다음 접시에서 고립 된 식민지가 자랍니다.

Shchukevich에 따른 순수 문화의 격리

파종을 위해 응축수와 함께 신선하게 준비된 영양 배지를 섭취하십시오. 검사할 물질을 루프로 가져와 매체와 벽을 건드리지 않고 무균 규칙을 준수하여 응축수에 조심스럽게 도입합니다. 이동성이 높은 박테리아는 한천 경사면의 젖은 표면에 "기어갑니다".

독립적인 작업의 결과로 학생은 다음을 알아야 합니다.

1. 곰팡이의 분류, 형태, 연구 방법.

2. 방선균류의 분류 및 형태.

3. 전염병 방지 체제 및 안전 예방 조치의 규칙.

가능하다:

1. 현미경으로 미생물을 구별합니다.

2. 염색된 제제의 현미경 검사.

3. 재료를 소독하고 소독제로 손을 씻습니다.

4. 순수한 문화에서 준비를 준비합니다.

CAMP 혈액 한천... 2% 영양 한천, pH 7.4-7.6에 양 또는 소의 0.2% 포도당과 적혈구를 첨가합니다. 구연산 혈액의 적혈구를 등장성 염화나트륨 용액으로 3회 세척하여 혈청에 포함될 수 있는 항용혈소를 제거한 다음 동일한 용액에 초기 혈액량으로 재현탁합니다. 적혈구의 5% 현탁액을 한천에 첨가합니다.

담즙 - 알칼리성 한천(이하 HA).건조 영양 한천 - 35.0g; 효모 자가 분해물 - 20.0 ml; 포도당 - 10.0g; 증류수 - 600ml. 한천을 녹이고 여과하고 신선한 소 담즙을 첨가합니다 - 400.0 ml 및 탄산나트륨 - 5.0 g.

준비된 배지를 112℃에서 15분간 고압증기멸균하여 멸균한다. 컵에 붓기 전에 신선한 혈액(숫양, 토끼 또는 사람) 50.0ml, 0.01% 크리스탈 바이올렛 용액 12.5ml 및 수산화칼륨 용액(이하 KOH) 20ml를 배지에 첨가합니다.

메틸렌 블루가 함유된 우유.신선한 우유를 끓여서 하루 동안 방치하고 크림을 제거하고 다시 끓여서 다시 하루 동안 방치하고 상단 층을 다시 제거합니다. 이러한 방식으로 탈지한 우유는 두꺼운 면모 층을 통해 여과되고 10% 탄산나트륨 용액으로 pH 7.2로 알칼리화됩니다. 우유 100ml에 1% 메틸렌블루 수용액 2.0ml를 가한다. 이렇게 하여 조제한 배지를 멸균시험관 5.0ml에 붓고 흐르는 증기로 30분간 3일간 멸균한다.

장구균 감별 진단 환경(EDDS).건조 영양 한천 - 35g, 영양 배지 준비를 위한 효모 자가 분해물 - 20ml, 포도당 - 10g, 증류수 - 800ml. 가열, 여과, 오토클레이브(pH 7.2-7.4)에서 15분 동안 112°C에서 멸균하면 녹습니다.

컵에 붓기 전에 TTX - 0.1g을 영양 배지에 첨가합니다. 크리스탈 바이올렛 0.01% - 12.5ml의 수용액; 날리딕산 - 0.1g; 44-45 ° C - 200 ml로 가열 된 멸균 탈지 우유; 신선한 섬유소 제거 혈액 (동물 또는 인간) - 50 ml. 내용물을 완전히 혼합하고 7ml 컵에 붓습니다.

칼륨 텔루라이트를 함유한 설탕 효모 영양 한천.건조 영양 한천 - 35g, 효모 자가 분해물 - 20ml, 포도당 - 10g, 증류수 - 1000ml. 준비된 혼합물을 가열하여 녹이고 구연산 나트륨 - 5.0g을 첨가하고 배지를 112 °에서 멸균합니다. C에서 15분, pH 7.2-7.4. 배지를 멸균 접시에 붓기 전에 말 혈청 50ml, 날리딕산 0.1g 및 텔루르산칼륨 0.7g(2% 수용액 35ml)을 넣고 완전히 섞는다.

포도당이 든 영양 국물. 0.2g의 포도당을 pH 7.2-7.4의 영양액 100ml에 첨가합니다.

준비된 배지를 0.5 기압에서 20분 또는 15분 동안 3일 연속으로 분획멸균한다. 오토클레이브에서.

5% 혈액 한천. 2% 영양 한천 100ml에 녹이고 45도까지 냉각시킨다. С, pH 7.4-7.6, 무균 규칙을 준수하면서 섬유소 제거 양고기, 말 또는 토끼 혈액 5ml를 첨가하십시오. 혼합물을 철저히 혼합하고 3-4mm 층의 컵에 붓습니다.


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설명 10733-00005

한천 배지 알칼리성 설명

알칼리성 한천 배지- Vibrio cholerae 분리를 위한 조밀한 영양 배지.
양질의 구성은 영양가가 높고 비브리오 콜로니의 빠른 형성을 촉진하는 반면 피로아황산나트륨은 수반되는 미생물총을 부분적으로 억제합니다.
상승된 pH 수준은 궁극적으로 외래 미생물의 발달을 억제하고 콜레라 병원체의 성장에 영향을 미치지 않는 선택적 인자이다.

한천 배지 알칼리성 기술적 특성

상승된 pH 수준은 궁극적으로 외래 미생물의 발달을 억제하고 콜레라 병원체의 성장에 영향을 미치지 않는 선택적 인자이다.
배양은 37 ° C에서 12-14 시간 동안 수행됩니다.

알칼리성 한천 조성 :
어분의 췌장 가수분해물, 펩톤 건조 발효제, 효모 추출물, 포도당, 이치환된 인산나트륨, 염화나트륨, 메타중아황산나트륨, 탄산나트륨, 한천.

알칼리성 한천 준비:
특정 일련의 영양 배지 제조에 필요한 양의 약물을 1 리터의 증류수에 혼합하고 한천이 완전히 녹을 때까지 끓인 다음 면 거즈 필터를 통해 여과하고 바이알에 붓고 오토 클레이브에서 멸균합니다.
(121 ± 1) ° C.
준비된 영양 배지, 투명, 노란색. 가벼운 유백색이 허용됩니다.
pH 8.0 ± 0.2
기성품 배지는 빛으로부터 보호되는 2-8 ° C의 온도에서 10-14 일 동안 보관할 수 있습니다.


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선물 미세하고 흡습성이며 빛에 민감한 황색 분말입니다.

시약 세트는 0.1ml의 미생물 현탁액을 접종할 때 테스트 스탬프의 성장을 보장해야 합니다. 각 테스트의 - 투과광에서 푸르스름한 색조가 있는 부드럽고 반투명한 집락의 형태로 37°C에서 12-14시간 배양 후 균주. 직경이 1.0mm 이상인 것.

감염된 물질에서 백일해 미생물을 분리하고 균주를 배양하도록 설계되었습니다.

구성:카제인의 췌장 가수분해물, 염화나트륨, 탄산나트륨, 탈수된 인산이나트륨, 사료 효모 추출물, 미생물 한천.

준비:라벨에 표시된 양의 영양 배지를 1리터의 증류수에 완전히 저어주고 한천이 완전히 녹을 때까지 가끔 저어주며 2-3분간 끓입니다. 면 거즈 필터를 통해 여과하고 바이알에 붓고 120 ° C의 온도에서 20 분 동안 고압 멸균하여 멸균합니다.

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