Laboratorija u kuhinji. mlijeko

Reakcije boje za proteine

Prisustvo proteina u biološkim objektima ili rastvorima može se odrediti pomoću reakcija u boji, čiji je tok posledica prisustva specifičnih grupa i peptidnih veza u proteinu.

reagensi: vodeni rastvor bjelanjka (bjelančevina jednog kokošje jaje odvojeno od žumanca, rastvoreno u 15-20 puta većoj zapremini destilovane vode, zatim se rastvor filtrira kroz gazu presavijenu u 3-4 sloja i čuva u frižideru 10% rastvor natrijum hidroksida; 30% rastvor natrijum hidroksida; 1% rastvor bakar sulfata; 1% rastvor olovnog acetata; koncentrirana dušična kiselina; 0,5% rastvor ninhidrina.

Oprema : epruvete; vodeno kupatilo ili alkohol.

Vježba 1. biuretna reakcija.

U alkalnoj sredini, proteini, kao i njihovi produkti hidrolize - peptidi, daju ljubičastu ili crveno-ljubičastu boju sa solima bakra. Reakcija je posljedica prisustva peptidnih veza u proteinima:

Intenzitet boje zavisi od dužine polipeptida.

Napredak

1. U epruvetu sipajte 5 kapi rastvora bjelanjka, zatim 10 kapi 10% rastvora alkalije.
2. Dodajte 1-2 kapi rastvora bakar sulfata, promešajte smešu. Pojavljuje se crveno-ljubičasta boja.

Zadatak 2. ksantoproteinska reakcija.

Reakcija je tipična za neke aromatične aminokiseline (fenilalanin, tirozin, triptofan), kao i za peptide koji ih sadrže. Pod djelovanjem dušične kiseline nastaje nitro spoj žuta boja. Nadalje, nitro derivati ​​mogu reagirati s alkalijom i formirati natrijevu sol koja ima žuto-narandžastu boju:

Napredak

Ovaj rad se mora obaviti u odvodu, uz posebnu pažnju!

1. U epruvetu sipajte 5 kapi rastvora bjelanjka i OPEZNO dodajte 3-4 kapi koncentrovane azotne kiseline duž zida.
2. Lagano zagrijte smjesu. Nastaje talog koji postaje žut.
3. Nakon hlađenja u epruvetu uliti 10 kapi 30% rastvora NaOH OPREZ duž zida, žuta boja prelazi u narandžastu.

Zadatak 3. Reakcija na aminokiseline koje sadrže sumpor (Folova reakcija).

U ostacima aminokiselina koje sadrže sumpor cisteina i cistina, sumpor se cijepa tijekom alkalne hidrolize, stvarajući sulfide. Sulfidi, u interakciji sa olovnim acetatom, formiraju crni ili smeđe-crni talog olovnog sulfida.

Napredak

1. U epruveti pomiješati 5 kapi otopine bjelanjka, 5 kapi 30% otopine alkalije i 2 kapi otopine olovnog acetata.
2. Lagano zagrijte smjesu na šporet šporetu do ključanja i prokuhajte. Nakon nekog vremena pojavljuje se smeđe-crna ili crna boja.

Zadatak 4. reakcija ninhidrina.

Reakcija je karakteristična za amino grupe u α-položaju i nastaje zbog prisustva α-aminokiselina u proteinskom molekulu. Kada se proteini zagreju vodeni rastvor ninhidrinske aminokiseline se oksidiraju i razgrađuju, stvarajući ugljični dioksid, amonijak i odgovarajući aldehid. Redukovani ninhidrin kondenzira se s amonijakom i oksidiranom molekulom ninhidrina da nastane ljubičasto-plavo jedinjenje:

Napredak

U epruvetu dodati 5 kapi 1% rastvora bjelanjka, dodati 3 kapi 0,5% rastvora ninhidrina i zagrejati do ključanja. Nakon 2-3 minute pojavljuje se ružičasta, crvena, a zatim plavo-ljubičasta boja.

Registracija rezultata

Rasporedite svoje istraživanje u obliku tabele.

napredak:

Ispunite eksperiment u bilježnici (u kavezu):

Iskustvo "Definicija proteina u ćeliji".

Svrha: naučiti ... .. (nastavak).

Oprema: čaša vode, brašno u gazi, makaze.

napredak:

1. Brašno umotano u gazu uronite u čašu vode na pola minuta. Izvadite, odrežite konac na gazi, rasklopite i prstom dodirnite dobijeno tijesto. Napišite u ovom pasusu

Šta gledaš? („Ako dodirnete mokro brašno, onda će to biti …?...., …?.....”)

2. Pronađite u udžbeniku: koja supstanca ima takve kvalitete? Donesite zaključak: koju ste organsku supstancu pronašli. („Zaključak: ova supstanca je ….?.... (…….) .”)

3. Pronađite u udžbeniku i zapišite u ovom pasusu vrijednost u ćeliji vaše organske tvari. („Značenje: ……..“)

Ispunite eksperiment u bilježnici (u kavezu):

Iskustvo "Definicija proteina u ćeliji".

Svrha: naučiti ... .. (nastavak).

Oprema: čaša vode, brašno u gazi, makaze.

napredak:

1. Brašno umotano u gazu uronite u čašu vode na pola minuta. Izvadite, odrežite konac na gazi, rasklopite i prstom dodirnite dobijeno tijesto. Napišite u ovom pasusu

Šta gledaš? („Ako dodirnete mokro brašno, onda će to biti …?...., …?.....”)

2. Pronađite u udžbeniku: koja supstanca ima takve kvalitete? Donesite zaključak: koju ste organsku supstancu pronašli. („Zaključak: ova supstanca je ….?.... (…….) .”)

3. Pronađite u udžbeniku i zapišite u ovom pasusu vrijednost u ćeliji vaše organske tvari. („Značenje: ……..“)

Na temu: metodološke izrade, prezentacije i bilješke

Prezentacija sadrži materijal za integrisani čas iz hemije i biologije na temu "Proteini, njihov sastav, svojstva i biološke funkcije". Slajdovi predstavljaju pitanja za samostalan rad učenika...

Biosinteza proteina u živoj ćeliji

Zadaci i ciljevi časa: Nastaviti sa formiranjem znanja o osnovnim procesima metabolizma; Opišite dvije faze biosinteze proteina, translaciju i transkripciju. Zadaci: Zapamtite značenje b ...

Sažetak lekcije o tehnologiji učenja zasnovanog na problemima "Biosinteza proteina u živoj ćeliji"

Okvir lekcije "Biosinteza proteina u živoj ćeliji" razvijen je korištenjem tehnologije učenja zasnovanog na problemu. Na času učenici ponavljaju svojstva genetskog koda, proces transkripcije, upoznaju se sa...

Cilj: proučavaju svojstva proteina.

Oprema i reagensi:- proteinski rastvor;

Otopina bakrenog sulfata;

otopina olovnog acetata;

epruvete

napredak:

1. Otapanje proteina

Mnogi proteini se otapaju u vodi, što je zbog prisustva slobodnih hidrofilnih grupa na površini proteinske molekule. Rastvorljivost proteina u vodi ovisi o strukturi proteina, reakciji medija i prisutnosti elektrolita. Proteini sa kiselim svojstvima se bolje rastvaraju u kiseloj sredini, dok se proteini sa bazičnim svojstvima bolje rastvaraju u alkalnoj sredini.

Albumini su visoko rastvorljivi u destilovanoj vodi, dok su globulini rastvorljivi u vodi samo u prisustvu elektrolita.

Proteini potpornih tkiva (kolagen, keratin, elastin itd.) se ne rastvaraju u vodi.

Oprema i reagensi:- bjelance;

Destilovana voda;

Otopina kalijevog klorida;

Keratin (vuna ili kosa).

napredak:

U 2 kapi nerazrijeđenog bjelanjka dodajte 1 ml destilovane vode i promiješajte. U ovom slučaju albumin jajeta se otapa, a globulin jajeta precipitira u obliku malog taloga.

Proverite rastvorljivost u vodi i 5% rastvoru kalijum hlorida keratin proteina koji se nalazi u vuni i kosi.

Rezultate rada rasporedite u obliku tabele:

1. Denaturacija proteina alkoholom.

Oprema i reagensi: rastvor proteina; etanol, epruvete

1. Taloženje proteina pri zagrijavanju.

Proteini su termolabilna jedinjenja i kada se zagreju iznad 50-60°C dolazi do denaturacije. Suština termičke denaturacije je raspoređivanje specifične strukture polipeptidnog lanca i uništavanje hidratacijske ljuske proteinskih molekula, što se očituje primjetnim smanjenjem njihove topljivosti. Najpotpunije i najbrže taloženje se dešava na izoelektričnoj tački, tj. pri takvoj pH vrijednosti medija, kada je ukupni naboj proteinske molekule nula, jer su u ovom slučaju proteinske čestice najmanje stabilne. Proteini sa kiselim svojstvima se talože u blago kiseloj sredini, a proteini sa bazičnim svojstvima talože se u slabo alkalnoj. U jako kiselim ili jako alkalnim otopinama, protein denaturiran zagrijavanjem se ne taloži, jer se njegove čestice ponovno pune i nose pozitivan naboj u prvom slučaju, a negativan u drugom, što povećava njihovu stabilnost u otopini.

Oprema i reagensi: - 1% rastvor bjelanjka;

1% rastvor sirćetna kiselina;

10% rastvor sirćetne kiseline;

10% rastvor natrijum hidroksida;

4 epruvete, držač, lampa.

Izvucite zaključke.________________________________

Uslovi za izvršenje zadatka

1. Mjesto (vrijeme) zadatka : zadatak se završava na času tokom nastave

2. Maksimalno vrijeme završetka zadatka: ____ 90 _______ min.

3. Možete koristiti udžbenik, bilješke sa predavanja

Skala obrazovnih postignuća:

Kriterijumi za ocjenjivanje: Obavljanje posla više od 90% - ocena "5",

70-90% - ocjena "4",

50 -70% - ocjena "3",

Manje od 50% - rezultat "2".

Praktični rad #1

Priprema otopine određene koncentracije.

Cilj:

• pripremiti otopine soli određene koncentracije.
• naučiti kako pripremiti otopinu određene koncentracije pomoću vaga i mjernog pribora.

Oprema:

• staklena lopatica;
• čaša od 50 ml;
• staklena šipka sa gumenim vrhom;
• mjerni cilindar;
• vage;
• hladno prokuvane vode.
• sol;

Teorijski dio

Rješenje-to je homogen sistem koji se sastoji od rastvarača, rastvorenih materija i proizvoda njihove interakcije. Rastvarač je obično supstanca koja čista forma ima isto stanje agregacije kao i rastvor, ili je prisutan u višku.

Prema stanju agregacije razlikuju se rješenja: tečni, čvrsti, gasoviti. Prema omjeru rastvarača i otopljene tvari: razrijeđeno, koncentrirano, zasićeno, nezasićeno, prezasićeno. Sastav otopine obično se prenosi sadržajem otopljene tvari kao masenim udjelom, postotnom koncentracijom i molarnošću.

• Maseni udio ( bezdimenzionalna količina) je omjer mase otopljenog
  tvari na masu cijele otopine:

W ppm = m rast. supstance /m rastvora.

• Procentualna koncentracija (%) je vrijednost koja pokazuje koliko grama otopljene tvari c sadrži 100 g. rješenje :

W % = m rast. supstance 100%/m rješenje

(udžbenik O.S. Gabrielyan, I.G. Ostroumov Hemija, M. "Akademija" 2013, str. 57)

• Molarna koncentracija, ili molarnost (mol / litar) je vrijednost koja pokazuje koliko molova otopljene tvari sadrži 1 litar otopine:

Cm = m rast. stvari/Mr (biljne supstance) V rastvor .

(udžbenik O.S. Gabrielyan, I.G. Ostroumov Hemija, M. "Akademija" 2013, str. 57)

Nastava - praktični rad

Tema „Analiza kvaliteta prehrambeni proizvodi. Detekcija proteina u test uzorku”.

pripremio nastavnik hemije Moskovske autonomne obrazovne ustanove Liceja br. 28 po imenu N.A. Ryabov

Popova S.I.

Svrha: „Utvrditi kvalitetu prehrambenih proizvoda. Istražite sadržaj proteina u predloženim uzorcima.

Zadaci:

1. Obrazovni:

formirati sposobnost rješavanja eksperimentalnih problema primijenjene prirode za utvrđivanje sadržaja proteina u prehrambenim proizvodima;

uspostaviti interdisciplinarne veze proučavanog teorijska osnova sa bliskim, "kućnim" problemima.

2. Obrazovni:

nastaviti sa formiranjem odgovornog, kreativnog odnosa prema obavljanju zadataka, tačnosti, zapažanja, upornosti;

nastaviti obrazovanje iz lokalne istorije;

negovanje pozitivnog stava prema zdravom načinu života; vaspitanje tolerancije, saradnje, samostalnosti.

3.Razvijanje:

razviti sposobnost prenošenja znanja u nove uslove;

razviti sposobnost izvođenja, posmatranja i opisivanja hemijskog eksperimenta;

razvijati mentalne operacije (analiza, sinteza, uspostavljanje uzročno-posledičnih veza, hipoteza, klasifikovanje, povlačenje analogija, generalizacija, sposobnost dokazivanja, isticanje glavne stvari);

unaprijediti komunikacijske vještine učenika u zajedničkim aktivnostima (sposobnost vođenja dijaloga, slušanja protivnika, potkrepljivanja svog gledišta razumom).

Vještine:

1. Opća laboratorija - provoditi grijanje; filtracija.

2. Organizacioni - posmatrati tačnost i jasnoću u radu, PTB, raditi po uputstvima, održavati čisto radno mesto, sastavljati zapisnike, vršiti samokontrolu.

(uvodna reč nastavnika)

Proteini u hrani igraju ulogu glavnog građevnog materijala za tijelo, bez kojeg je nemoguća njegova vitalna aktivnost, rast i obnova stanica.

Kao što vjerojatno već znate, svaki proizvod se sastoji od proteina, masti i ugljikohidrata, a naš glavni zadatak je vješto ih kombinirati u svakodnevnoj prehrani.

Jedan odglavni principi zdrava ishrana samo kaže da hrana treba da bude uravnotežena i da sadrži optimalnu količinu proteini, masti i ugljikohidrati.

Proteinska hrana je jedna od najvažnijih komponenti ishrane svake osobe. Sa nedostatkom proteina, proces cijepanja masti je nemoguć, što je opet zadovoljavajuće. proteinski proizvod omogućava vam da povećate vrijeme apsorpcije ugljikohidrata, pomažući u održavanju stabilne razine šećera u krvi i suzbijanju gladi.

Kakva je struktura proteina? (Rad sa kompleksom "Vizuelna škola" - proteinske strukture)

Raspravlja se o kvalitativnim reakcijama na proteine

(Prebaci na novu temu)

Procjena kvaliteta hrane, utvrđivanje mikrobiološke kontaminacije su vrlo odgovorni i dugotrajni procesi. Pristup svakom uzorku je napravljen striktno individualno.

Postoji nekoliko vrsta istraživanja kvaliteta hrane:

organoleptički - miris, ukus, boja, zamućenost, temperatura, strani filmovi, padavine;

fizičko i hemijsko - kvalitativni sastav deklarisanog uzorka, prisustvo nečistoća (fizičkih i hemijskih);

mikrobiološki - utvrđivanje prisustva stranih mikroorganizama, infekcija u uzorku za ispitivanje (posebno važna vrsta istraživanja koju preporučuje Analitička kompanija za hranu za bebe);

sveobuhvatan – ispitivanje usklađenosti proizvoda sa određenim GOST, GOST R, TU, SaNPin i drugim standardima koji utvrđuju kriterijume bezbednosti za ljude.

Momci su podijeljeni u 4 grupe i provode 2 eksperimenta prema prethodno izdatom uputstvu. . Zatim svi studenti popunjavaju laboratorijski dnevnik, nakon čega slijedi diskusija o rezultatima.

PRIJE vježbanja ponovite sigurnosna pravila !

Iskustvo br. 1. Utvrđivanje kvaliteta pasterizacije mlijeka.

Pasterizacija omogućava uništavanje patogenih mikroorganizama koji narušavaju kvalitet mlijeka. Sadržaj proteina ne treba da se smanji.

1. U 3 ml mlijeka dodajte 3 ml destilovane vode.

2. Kap po kap dodavati 0,1 N rastvorH 2 SO 4 kazeinske pahuljice. Filter.

3. Filtrirati. Zagrijte do ključanja.

KLJUČ. Kazeinske pahuljice se ponovo pojavljuju u sirovom mlijeku .

4. Pretpostaviti stepen pasterizacije mlijeka u ispitivanim uzorcima.

5. Predložite razloge za falsifikovanje različitih uzoraka.

6. U dobijeni uzorak dodajte nekoliko kapi koncentrovane azotne kiseline. Zagrijati. Žuto bojenje ukazuje na prisustvo aromatičnih prstenova u proteinu (ksantoproteinska reakcija).

Iskustvo broj 2.

Određivanje svježine mlijeka

U 3 ml 1% rastvora fenola dodati 3 ml 1% rastvora gvožđe hlorida (III), obratite pažnju na ljubičastu boju, dodajte 3 ml mlijeka.

KLJUČ. Kiselo mlijeko daje žuto-zelenu boju.

Postavite stepen svježine, razloge za krivotvorenje različitih uzoraka.

Iskustvo broj 3.

Određivanje nečistoća u kiseloj pavlaci.

Sipajte 10 ml vrele vode u čašu. IN vruća voda stavite kašiku pavlake.

KLJUČ. U prisustvu nečistoća (svježi sir, kefir, škrob), mast će plutati, a kazein će se taložiti na dno.

Znajući da obično kiselo vrhnje ne bi trebalo da ima talog, sugerišite razloge za falsifikovanje različitih uzoraka.

Iskustvo br. 4

Određivanje svježine mesa.

1. kuvati mesna čorba. (4 ml vode + komad mesa zagrijati da provri).

2. Filtrirajte u tikvicu pomoću levka.

3.Dodajte 5 kapi %H 2 SO 4 i nakon nekoliko minuta zabilježite rezultat.

KLJUČ. IN svježa čorba rastvor je providan, uz upitnu svežinu rastvor postaje mutan, a ustajalo meso definitivno ima želeast talog sa ljuspicama.

Odredite stepen krivotvorenja uzorka. Uporedite nekoliko različitih uzoraka. Predložite razloge za različite rezultate.

Iskustvo broj 5.

Određivanje proteina u predloženim proizvodima.

1 Sipajte 4 ml vode u 3 epruvete. Dodajte 0,5 prema 1 bujonska kocka, u 2. komad mesa, u 3. komad kobasice. Kuhajte.

2.Filter.

3. Dodajte koncentrovanoHNO 3 kap po kap i malo zagrejati.

KLJUČ. U otopini u kojoj je prisutan protein pojavit će se žuta boja.

Procijenite kvalitetu uzoraka.