Laboratorium på kjøkkenet. melk

Fargereaksjoner for proteiner

Tilstedeværelsen av proteiner i biologiske gjenstander eller løsninger kan bestemmes ved hjelp av fargereaksjoner, hvis forløp skyldes tilstedeværelsen av spesifikke grupper og peptidbindinger i proteinet.

Reagenser: en vandig løsning av eggehvite (protein av en kylling egg separert fra eggeplommen, oppløst i 15–20 ganger volumet av destillert vann, deretter filtreres løsningen gjennom gasbind foldet i 3–4 lag og oppbevares i kjøleskapet, 10 % natriumhydroksidløsning; 30% natriumhydroksidløsning; 1% kobbersulfatløsning; 1% blyacetatløsning; konsentrert salpetersyre; 0,5 % ninhydrinløsning.

Utstyr : prøverør; vann bad eller alkohol.

Øvelse 1. biuretreaksjon.

I et alkalisk miljø gir proteiner, så vel som deres hydrolyseprodukter - peptider, en fiolett eller rødfiolett farge med kobbersalter. Reaksjonen skyldes tilstedeværelsen av peptidbindinger i proteiner:

Fargeintensiteten avhenger av lengden på polypeptidet.

Framgang

1. Hell 5 dråper eggehviteløsning i et reagensrør, deretter 10 dråper 10 % alkaliløsning.
2. Tilsett 1-2 dråper kobbersulfatløsning, rør blandingen. En rød-fiolett farge vises.

Oppgave 2. xantoproteinreaksjon.

Reaksjonen er typisk for noen aromatiske aminosyrer (fenylalanin, tyrosin, tryptofan), så vel som for peptider som inneholder dem. Under påvirkning av salpetersyre dannes en nitroforbindelse gul farge. Videre kan nitroderivater reagere med alkali for å danne et natriumsalt som har en gul-oransje farge:

Framgang

Dette arbeidet må utføres i avtrekksskap, med spesiell forsiktighet!

1. Hell 5 dråper eggehviteløsning i et reagensglass og tilsett FORSIKTIG 3-4 dråper konsentrert salpetersyre langs veggen.
2. Varm opp blandingen forsiktig. Det dannes et bunnfall som blir gult.
3. Etter avkjøling, hell 10 dråper 30 % NaOH-løsning i reagensrøret FORSIKTIG langs veggen, den gule fargen endres til oransje.

Oppgave 3. Reaksjon på svovelholdige aminosyrer (Fols reaksjon).

I restene av de svovelholdige aminosyrene cystein og cystin spaltes svovel av under alkalisk hydrolyse, og danner sulfider. Sulfider, som interagerer med blyacetat, danner et svart eller brunsvart blysulfidutfelling.

Framgang

1. Bland i et reagensrør 5 dråper eggehviteløsning, 5 dråper 30 % alkaliløsning og 2 dråper blyacetatløsning.
2. Varm blandingen forsiktig på spritkomfyr til koking og kok opp. Etter en stund vises en brunsvart eller svart farge.

Oppgave 4. ninhydrinreaksjon.

Reaksjonen er karakteristisk for aminogrupper i α-posisjonen og skyldes tilstedeværelsen av α-aminosyrer i proteinmolekylet. Når protein varmes opp vandig løsning ninhydrin-aminosyrer oksideres og dekomponeres, og danner karbondioksid, ammoniakk og det tilsvarende aldehydet. Det reduserte ninhydrin kondenserer med ammoniakk og et oksidert ninhydrinmolekyl for å danne en fiolettblå forbindelse:

Framgang

Tilsett 5 dråper av en 1 % løsning av eggehvite i et reagensrør, tilsett 3 dråper av en 0,5 % løsning av ninhydrin og varm opp til kokepunktet. Etter 2-3 minutter vises en rosa, rød og deretter blåfiolett farge.

Registrering av resultater

Ordne forskningen din i form av en tabell.

Framgang:

Fyll ut eksperimentet i en notatbok (i et bur):

Opplev "Definisjon av protein i en celle".

Formål: å lære ... .. (fortsett).

Utstyr: et glass vann, mel i gasbind, saks.

Framgang:

1. Dypp melet pakket inn i gasbind i et glass vann i et halvt minutt. Ta ut, kutt tråden på gasbindet, brett ut og berør den resulterende deigen med fingeren. Skriv i dette avsnittet

hva er det du ser på? ("Hvis du berører det våte melet, blir det ...?...., ...?.....")

2. Finn i læreboken: hvilket stoff har slike egenskaper? Lag en konklusjon: hvilket organisk stoff fant du. (“Konklusjon: dette stoffet er ….?... (…….) .”)

3. Finn i læreboken og skriv ned i dette avsnittet verdien i cellen til det organiske materialet ditt. ("Betydning: …….. .")

Fyll ut eksperimentet i en notatbok (i et bur):

Opplev "Definisjon av protein i en celle".

Formål: å lære ... .. (fortsett).

Utstyr: et glass vann, mel i gasbind, saks.

Framgang:

1. Dypp melet pakket inn i gasbind i et glass vann i et halvt minutt. Ta ut, kutt tråden på gasbindet, brett ut og berør den resulterende deigen med fingeren. Skriv i dette avsnittet

hva er det du ser på? ("Hvis du berører det våte melet, blir det ...?...., ...?.....")

2. Finn i læreboken: hvilket stoff har slike egenskaper? Lag en konklusjon: hvilket organisk stoff fant du. (“Konklusjon: dette stoffet er ….?... (…….) .”)

3. Finn i læreboken og skriv ned i dette avsnittet verdien i cellen til det organiske materialet ditt. ("Betydning: …….. .")

Om temaet: metodologisk utvikling, presentasjoner og notater

Presentasjonen inneholder stoff til en integrert leksjon i kjemi og biologi om temaet "Proteiner, deres sammensetning, egenskaper og biologiske funksjoner." Lysbildene presenterer spørsmål for selvstendig arbeid av studenter ...

Biosyntese av proteiner i en levende celle

Oppgaver og mål for leksjonen: Å fortsette dannelsen av kunnskap om de grunnleggende prosessene for metabolisme; Beskriv de to stadiene av proteinbiosyntese, translasjon og transkripsjon. Oppgaver: Husk betydningen av b ...

Leksjonsoppsummering om problembasert læringsteknologi "Proteinbiosyntese i en levende celle"

Omrisset av leksjonen "Proteinbiosyntese i en levende celle" ble utviklet ved hjelp av problembasert læringsteknologi. I leksjonen gjentar elevene egenskapene til den genetiske koden, prosessen med transkripsjon, blir kjent med ...

Mål: studere egenskapene til proteiner.

Utstyr og reagenser:- proteinløsning;

En løsning av kobbersulfat;

Bly acetate løsning;

prøverør

Framgang:

1. Proteinoppløsning

Mange proteiner løses opp i vann, noe som skyldes tilstedeværelsen av frie hydrofile grupper på overflaten av proteinmolekylet. Løseligheten til et protein i vann avhenger av strukturen til proteinet, reaksjonen til mediet og tilstedeværelsen av elektrolytter. Proteiner med sure egenskaper løses bedre opp i et surt miljø, mens proteiner med basiske egenskaper løses bedre opp i et alkalisk miljø.

Albuminer er svært løselige i destillert vann, mens globuliner er løselige i vann bare i nærvær av elektrolytter.

Proteiner fra støttevev (kollagen, keratin, elastin, etc.) løses ikke opp i vann.

Utstyr og reagenser:- eggehvite;

Destillert vann;

Kaliumkloridløsning;

Keratin (ull eller hår).

Framgang:

Til 2 dråper ufortynnet eggehvite tilsett 1 ml destillert vann og bland. I dette tilfellet oppløses eggalbumin, og egglobulin utfelles i form av et lite bunnfall.

Sjekk løseligheten i vann og 5 % kaliumkloridløsning av keratinprotein i ull og hår.

Ordne resultatene av arbeidet i form av en tabell:

1. Proteindenaturering med alkohol.

Utstyr og reagenser: proteinløsning; etanol, reagensrør

1. Utfelling av proteiner ved oppvarming.

Proteiner er termolabile forbindelser og når de varmes opp over 50-60°C, oppstår denaturering. Essensen av termisk denaturering er utplasseringen av en spesifikk struktur av polypeptidkjeden og ødeleggelsen av hydreringsskallet til proteinmolekyler, som manifesteres av en merkbar reduksjon i deres løselighet. Den mest komplette og raskeste avsetningen skjer ved det isoelektriske punktet, dvs. ved en slik pH-verdi av mediet, når den totale ladningen til proteinmolekylet er null, siden i dette tilfellet er proteinpartiklene minst stabile. Proteiner med sure egenskaper utfelles i et lett surt miljø, og proteiner med basiske egenskaper utfelles i et lett alkalisk. I sterkt sure eller sterkt alkaliske løsninger utfelles ikke proteinet som denatureres ved oppvarming, siden partiklene lades opp og bærer en positiv ladning i det første tilfellet, og en negativ ladning i det andre, noe som øker deres stabilitet i løsningen.

Utstyr og reagenser: - 1% eggehviteløsning;

1 % løsning eddiksyre;

10% eddiksyreløsning;

10 % natriumhydroksidløsning;

4 prøverør, holder, spritlampe.

Trekke konklusjoner._____________________________

Vilkår for å fullføre oppgaven

1. Sted (tid) for oppgaven : oppgaven gjennomføres i klassen i timen

2. Maksimal oppgavegjennomføringstid: ____ 90 _______ min.

3. Du kan bruke lærebok, forelesningsnotater

Skala for utdanning:

Kriterier for evaluering: Ytelse av arbeid mer enn 90% - karakter "5",

70-90 % - karakter "4",

50 -70 % - karakter "3",

Mindre enn 50 % - score "2".

Praktisk arbeid #1

Fremstilling av en løsning med en gitt konsentrasjon.

Mål:

• tilbered løsninger av salter med en viss konsentrasjon.
• lære hvordan du tilbereder en løsning av en gitt konsentrasjon ved hjelp av vekter og måleredskaper.

Utstyr:

• glass spatel;
• et glass på 50 ml;
• glassstang med gummitupp;
• måling sylinder;
• vekter;
• kald kokt vann.
• salt;

Teoretisk del

Løsning-det er et homogent system som består av et løsningsmiddel, oppløste stoffer og produkter av deres interaksjon. Løsemidlet er vanligvis stoffet som ren form har samme aggregeringstilstand som løsningen, eller er tilstede i overkant.

I henhold til aggregeringstilstanden skilles løsninger ut: flytende, fast, gassformig. I henhold til forholdet mellom løsemiddel og oppløst stoff: fortynnet, konsentrert, mettet, umettet, overmettet. Sammensetningen av en løsning formidles vanligvis av innholdet av oppløst stoff som en massefraksjon, prosentkonsentrasjon og molaritet.

• Massefraksjon ( dimensjonsløs mengde) er forholdet mellom massen av oppløst
  stoffer til massen av hele løsningen:

W ppm = m rast. stoffer /m løsning.

• Prosent konsentrasjon (%) er en verdi som viser hvor mange gram av et oppløst stoff c som er i 100 g. løsning :

W % = m rast. stoffer 100 %/m løsning

(lærebok O.S. Gabrielyan, I.G. Ostroumov Chemistry, M. "Academy" 2013, s. 57)

• Molar konsentrasjon, eller molaritet (mol / liter) er en verdi som viser hvor mange mol av et oppløst stoff som finnes i 1 liter løsning:

Cm = m rast. tingene/Mr (plantestoffer) V løsning .

(lærebok O.S. Gabrielyan, I.G. Ostroumov Chemistry, M. "Academy" 2013, s. 57)

Leksjon - praktisk arbeid

Tema "Kvalitetsanalyse matvarer. Påvisning av protein i testprøven”.

utarbeidet av en kjemilærer ved Moskva Autonomous Educational Institution of Lyceum nr. 28 oppkalt etter N.A. Ryabov

Popova S.I.

Formål: «Å bestemme kvaliteten på matvarer. Undersøk de foreslåtte prøvene for proteininnhold.

Oppgaver:

1. Pedagogisk:

å danne evnen til å løse eksperimentelle problemer av anvendt karakter for å fastslå innholdet av proteiner i matvarer;

etablere tverrfaglige forbindelser av de studerte teoretisk grunnlag med nære, "hjemme" problemer.

2. Pedagogisk:

å fortsette dannelsen av en ansvarlig, kreativ holdning til utførelsen av oppgaver, nøyaktighet, observasjon, utholdenhet;

fortsette lokalhistorisk utdanning;

fremme en positiv holdning til en sunn livsstil; utdanning av toleranse, samarbeid, uavhengighet.

3. Utvikle:

utvikle evnen til å overføre kunnskap til nye forhold;

utvikle evnen til å gjennomføre, observere og beskrive et kjemisk eksperiment;

utvikle mentale operasjoner (analyse, syntese, etablere årsak-og-virkning-forhold, hypotese, klassifisering, tegne analogier, generalisering, evne til å bevise, fremheve det viktigste);

å forbedre kommunikasjonsferdighetene til elevene i felles aktiviteter (evnen til å føre en dialog, lytte til en motstander, underbygge ens synspunkt med fornuft).

Ferdigheter:

1. Generelt laboratorium - gjennomføre oppvarming; filtrering.

2. Organisatorisk - å observere nøyaktighet og klarhet i arbeidet, PTB, arbeide etter instrukser, opprettholde en ren arbeidsplass, utarbeide journaler, utøve selvkontroll.

(innledningsforedrag fra læreren)

Proteiner i mat spille rollen som hovedbyggematerialet for kroppen, uten hvilken dens vitale aktivitet, vekst og restaurering av celler er umulig.

Som du sikkert allerede vet, består ethvert produkt av proteiner, fett og karbohydrater, og vår hovedoppgave er å dyktig kombinere dem i vårt daglige kosthold.

En avhovedprinsipper spise sunt sier bare at mat skal være balansert, og inneholde optimal mengde proteiner, fett og karbohydrater.

Proteinmat er en av de viktigste komponentene i kostholdet til enhver person. Med mangel på proteiner er prosessen med å dele fett umulig, noe som igjen er tilfredsstillende. proteinprodukt lar deg øke absorpsjonstiden for karbohydrater, bidrar til å opprettholde stabile blodsukkernivåer og undertrykke sult.

Hva er strukturen til protein? (Jobber med "Visuell skole"-komplekset - proteinstrukturer)

Kvalitative reaksjoner på protein diskuter

(Bytt til nytt emne)

Evaluering av matkvalitet, bestemmelse av mikrobiologisk forurensning er svært ansvarlige og tidkrevende prosesser. Tilnærmingen til hver prøve er laget strengt individuelt.

Det finnes flere typer matkvalitetsforskning:

organoleptisk - lukt, smak, farge, turbiditet, temperatur, fremmede filmer, nedbør;

fysisk og kjemisk - den kvalitative sammensetningen av den deklarerte prøven, tilstedeværelsen av urenheter (både fysiske og kjemiske);

mikrobiologiske - bestemmelse av tilstedeværelsen av fremmede mikroorganismer, infeksjoner i testprøven (en spesielt viktig type forskning anbefalt av Analytic Company for babymat);

omfattende – undersøkelse for samsvar av produktet med visse GOST, GOST R, TU, SaNPin og andre standarder som fastsetter sikkerhetskriterier for mennesker.

Gutta er delt inn i 4 grupper og gjennomfører 2 eksperimenter i henhold til en tidligere utstedt instruksjon. . Deretter fyller alle studentene ut en laboratoriejournal, etterfulgt av en diskusjon av resultatene.

FØR du øver, gjenta sikkerhetsreglene !

Erfaring nr. 1. Bestemme kvaliteten på melkepasteurisering.

Pasteurisering sørger for ødeleggelse av patogene mikroorganismer som forringer kvaliteten på melk. Proteininnholdet skal ikke synke.

1. Til 3 ml melk tilsett 3 ml destillert vann.

2. Dråpe for dråpe tilsett 0,1 N løsningH 2 SÅ 4 kaseinflak. Filter.

3. Filtrerer. Varm opp til koking.

NØKKEL. Kaseinflak dukker opp igjen i rå melk .

4. Anta graden av melkepasteurisering i de studerte prøvene.

5. Foreslå årsakene til forfalskning av ulike prøver.

6. Tilsett noen dråper konsentrert salpetersyre til den oppnådde prøven. Varme opp. Gul farging indikerer tilstedeværelsen av aromatiske ringer i proteinet (xantoproteinreaksjon).

Erfaring nummer 2.

Bestemmelse av melkens friskhet

Til 3 ml 1 % fenolløsning tilsett 3 ml 1 % jernkloridløsning (III), legg merke til den lilla fargen, tilsett 3 ml melk.

NØKKEL. Surmelk gir en gulgrønn farge.

Still inn graden av friskhet, årsakene til forfalskning av forskjellige prøver.

Erfaring nummer 3.

Bestemmelse av urenheter i rømme.

Hell 10 ml varmt vann i et beger. I varmt vann legg en skje rømme.

NØKKEL. I nærvær av urenheter (cottage cheese, kefir, stivelse), vil fett flyte, og kasein vil legge seg til bunnen.

Å vite at rømme normalt ikke skal ha sediment, foreslår årsakene til forfalskning av ulike prøver.

Erfaring nr. 4

Bestemmelse av kjøttets friskhet.

1. kokk kjøttbuljong. (Varm 4 ml vann + et kjøttstykke til et oppkok).

2. Filtrer over i en kolbe med en trakt.

3. Legg til 5 dråper %H 2 SÅ 4 og legg merke til resultatet etter noen minutter.

NØKKEL. I fersk kjøttkraft løsningen er gjennomsiktig, med tvilsom friskhet blir løsningen grumsete, og definitivt gammelt kjøtt har et gelélignende sediment med flak.

Bestem graden av prøveforfalskning. Sammenlign flere forskjellige prøver. Foreslå årsaker til de forskjellige resultatene.

Erfaring nummer 5.

Bestemmelse av protein i de foreslåtte produktene.

1Hell 4 ml vann i 3 reagensglass. Legg til 0,5 til 1 buljongterning, i 2. kjøttstykke, i 3. pølsestykke. Kok opp.

2.Filter.

3. Tilsett konsentrertHNO 3 dråpe for dråpe og varme opp litt.

NØKKEL. I en løsning der protein er tilstede, vil en gul farge vises.

Lag en vurdering om kvaliteten på prøvene.